【蓝白斑筛选原理】蓝白斑筛选是分子生物学中常用的基因克隆筛选方法,主要用于检测重组质粒是否成功插入外源DNA。其原理基于β-半乳糖苷酶(LacZ)基因的完整性。
当质粒中LacZ基因未被破坏时,细菌在含有X-gal的培养基中会呈现蓝色;若LacZ被插入片段破坏,则细菌呈白色。通过观察菌落颜色,可快速判断是否发生重组。
项目 | 内容 |
原理 | LacZ基因完整性决定菌落颜色 |
蓝色菌落 | LacZ未被破坏,正常表达β-半乳糖苷酶 |
白色菌落 | LacZ被破坏,无法产生酶,显白色 |
应用 | 快速筛选重组质粒 |
该方法操作简便、效率高,广泛应用于基因工程和分子克隆实验中。
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