【大肠杆菌感受态的制备注意事项】在进行大肠杆菌感受态细胞的制备时,需注意多个关键环节,以确保实验成功率。以下是主要注意事项的总结:
注意事项 | 内容说明 |
菌株选择 | 使用合适菌株(如DH5α、TOP10等),确保其具有良好的转化效率。 |
培养条件 | 选用对数生长期的菌液,一般OD600值控制在0.3-0.6之间。 |
冷冻保存 | 制备好的感受态细胞应立即分装并冷冻保存于-80℃,避免反复冻融。 |
操作温度 | 整个操作过程应在冰上进行,防止细胞失活。 |
试剂质量 | 使用高质量的CaCl₂溶液,避免杂质影响转化效果。 |
转化时间 | 转化后需适当热休克处理(通常42℃ 90秒),随后迅速冷却。 |
以上步骤是保证大肠杆菌感受态制备成功的关键因素,需严格遵循实验规范。
以上就是【大肠杆菌感受态的制备注意事项】相关内容,希望对您有所帮助。