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工具型AAV的相关介绍

标签: AAV 相关介绍
摘要 : AAV-SaCas9-gRNA在体基因敲除系统

AAV-SaCas9-gRNA在体基因敲除系统

SaCas9 (staphylococcus aureus cas9)来自金黄色葡萄球菌,基因长度由经典的spCas9(Streptococcus pyogenes)的4400bp缩短为3300bp,基因大小大幅减少了25%。SaCas9可以被装载进入腺相关病毒(AAV)而不影响AAV的包装和活力,因此提供了一个非常方便有效的在体基因操作工具
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根据SaCas9的PAM序列NNGRRT设计合成靶向目的基因的guide RNA序列,通过BsaI酶切位点连入AAV载体质粒,包装纯化AAV病毒之后即可注射动物感染目的组织进行目的基因的在体基因敲除
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在体自噬流检测:AAV-mRFP-gfp-LC3

自噬简介

细胞自噬(autophagy or autophagocytosis):又称为Ⅱ型细胞死亡,是细胞在自噬相关基因(autophagy related gene,Atg) 的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程。
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自噬过程是动态变化的,自噬体的形成、自噬性底物向溶酶体的运送以及在溶酶体内降解的整个过程称为自噬流(Autophagy flux)。自噬流的检测最有效的方式是通过mRFP-GFP-LC3工具来反映。黄色荧光点代表自噬小体阶段,红色荧光代表自噬小体和自噬溶酶体阶段
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最有效的在体自噬流检测工具:AAV-mRFP-GFP-LC3

汉恒生物技术工程师构建RFP-GFP-LC3双标的腺相关病毒(AAV)载体,包装成双标的腺相关病毒,可在体观察自噬,实时检测自噬流的强弱,更加准确、清晰、直观!弥补了LC3自噬双标腺病毒在体转染的缺陷,并且可根据组织器官的亲和性,选择不同的AAV血清型,是最有效的载体自噬流检测工具!
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作者:汉恒生物 点击:

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