生物科学门户网站
BIO1000.COM

第一个强大的戊型肝炎病毒细胞培养模型

尽管戊型肝炎每年导致超过300万例感染,约70,000人死亡,但对该病毒的研究仍很少。这可能会改变,因为来自Bochum和Hanover的研究小组已经开发了一种健壮且改良的病原体细胞模型。它产生的感染性病毒颗粒比以前的模型多约100倍。波鸿鲁尔大学分子与医学病毒学系主任Eike Steinmann教授说:“结果,我们终于可以对病毒进行深入研究了。”研究人员于2020年1月2日在PNAS杂志上发表了他们的研究结果。

突变导致增殖增加

缺乏健壮的细胞培养模型是迄今为止很少研究戊型肝炎病毒(HEV)的原因之一。“从先前的模型中产生的传染性病毒颗粒的数量太少而无法产生可重复的结果,”波鸿(Bochum)的作者丹尼尔·托特(Daniel Todt)博士解释说。

在以前的研究中,研究小组分析了患者中病毒的基因突变所导致的病毒种群,并确定了导致病原体大量繁殖的特定遗传变化。科学家将这种突变插入到以前使用的细胞系中,从而能够将新病毒颗粒的产量提高五到十倍。

在他们当前的文章中,他们通过添加特殊的培养基并使用不同的肝细胞系来优化细胞培养条件。这些措施产生的感染性病毒颗粒比以前公布的多大约100倍。

大量测试表明该模型有效

为了验证新的细胞培养模型是否可以用于研究病毒,研究人员进行了几次实验。例如,他们测试了包膜和裸露病毒是否以相同的方式产生。来自汉诺威Twincore实验和临床感染研究中心实验病毒学的研究作者Martina Friesland解释说:“病毒的两种变体都发生在HEV患者中。”“但是,它们负责不同的感染途径。虽然包膜病毒是通过血液接触(例如输血)传播的,但裸露的病毒是通过粪便排出体外的,并导致感染,例如通过污染的饮用水。”现在可以使用新的细胞培养模型研究两种变体。

在先前的研究中,作者已经表明,该突变导致所有戊型肝炎病毒中增殖的增加,并且在该研究中使用的各种肝细胞系中也是如此。在当前的研究中,他们再次优化了模型。“为此,我们利用在临床中获得的见识来改进临床前体外模型,”丹尼尔·托特(Daniel Todt)说道。在健康的人肝细胞以及动物模型中,增殖增加的效果也很明显。在这里,可以在啮齿动物的血液和粪便中检测病毒颗粒超过一个月。Daniel Todt指出:“在以前的模型中,只有在粪便中才可能进行检测,因为产生的病毒颗粒数量太少。”“现在,

充分掌握细节

由于这是他们首次使用源自细胞培养物的HEV可复制地感染从健康肝脏组织分离的细胞,因此研究人员进行了深度测序:他们在感染的不同时间点分析了病毒的全部遗传信息,不受毒品影响。此外,他们研究了在药物影响下和无药物影响下,受感染的肝细胞不同蛋白质表达对感染的反应。“我们想知道细胞对感染的反应,”丹尼尔·托特说。Eike Steinmann指出:“我们的目的是全面了解细节。””

郑重声明:本文版权归原作者所有,转载文章仅为传播更多信息之目的,如作者信息标记有误,请第一时间联系我们修改或删除,多谢。