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血清使用知识点介绍

摘要 : 血清应保存在-20℃以下。若存放于4℃时,请勿超过半个月。

使用血清知识介绍:

1、存放血清最好的办法?

血清应保存在-20℃以下。若存放于4℃时,请勿超过半个月。

2、如何解冻血清才不会使质量受损?

血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

3、如何处理血清解冻后出现的絮状沉淀物?

血清中沉淀物的出现有许多种原因,但主要原因是由于血清中蛋白的变性所造成。血纤素蛋白(形成凝血的蛋白之一)也是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。以过滤的方法去除这些絮状沉淀物会导致过滤膜的阻塞。

4、为什么要热灭活血清?

加热可以灭活补体系统。激活的补体将会参与有关细胞的溶解过程,刺激平滑肌收缩、细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。建议在培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,使用热灭活血清。

5、有必要做热灭活吗?

大多数细胞的培养不需要经过热灭活处理的血清。热灭活血清对细胞的生长只有微小的促进或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的活性,造成细胞生长速度的降低。同时经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物会让使用者误以为是微生物的污染。若非必须,可以不需要做热处理这一步,不但节省时间,更确保血清的质量。

6、如何避免沉淀物的产生?

建议在使用血清的时候,注意下列的操作:

(1)解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37 ℃),非常容易产生沉淀物。

(2) 解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。

(3)请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。

(4) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多。若非必要,可以无须进行热灭活处理。

(5) 若必须做血清的热灭活,应严格控制56℃热处理30分钟,并且随时摇晃均匀。温度过高、时间过久以及摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。

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