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缓冲盐冲洗色谱柱方法

摘要 : 流动相中含有缓冲盐时,大的原则是:使用前要过渡,使用后要清洗(清洗包括两个步骤,一个步骤是用来清洗缓冲盐,另一个步骤是用来清洗强保留物质的),具体请按如下方式保养色谱柱

流动相中含有缓冲盐时,大的原则是:使用前要过渡,使用后要清洗(清洗包括两个步骤,一个步骤是用来清洗缓冲盐,另一个步骤是用来清洗强保留物质的),具体请按如下方式保养色谱柱:

1、使用前的过渡:

用乙腈:水=10:90(如果是甲醇体系则用甲醇:水=10:90)以1ml/min流速过渡30min(目的是防止缓冲盐在进入柱子时析出);

2、一天分析完成后,即使用后的清洗:

1)用乙腈:水=10:90(或甲醇:水=10:90)以1ml/min流速反向冲洗45min(目的是洗去缓冲盐,防止缓冲盐在色谱柱内存留引起使用寿命下降);

2)再用乙腈:水=90:10(或甲醇:水=90:10)1ml/min流速反向冲洗45min,(目的是洗去分析过程中积累的强保留物质,防止强保留物质在色谱柱内进一步积累,影响以后的分析,也防止强保留物质的积累导致的柱压升高),然后色谱柱保存在乙腈:水=90:10(或甲醇:水=90:10)中;

3、如果做完一种化合物,紧接着要做另外一种化合物,由于流动相等条件不同,则请先按步骤2清洗色谱柱,再使用色谱柱;要是接下来做的样品的流动相里也含有缓冲盐,也请在步骤2清洗过后再按步骤1的方式来过渡。

1)乙腈:水=10:90或甲醇:水=10:90容易长菌,温度越高越容易长菌,实验表明,在28度条件下保存至第5天时发现长菌,不宜多配。

2)Welch公司的色谱柱都能反向冲洗或使用,如果您使用的色谱柱不能反向冲洗或使用,则无需反冲,正向冲洗本方法也适用,只是反冲的效果相对较好。

作者:青岚 点击:

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