当前位置:生物帮 > 实验技巧 > 生物化学技术 > 正文

色谱柱的选择与使用方法

摘要 : 属于正相色谱,反相色谱都可以用,多用于含苯基的物质,属于专用柱子。其在用于正相色谱时,可用如正己烷等低极性流动相,参照对应的硅胶柱,在用于反相色谱时,可使用甲醇或水的强极性流动相,参照对应的C18柱子。冲洗方法同氰基柱。

问:哪个公司的色谱柱好?

chromexpert:

色谱柱从大的分有气相用、液相用、毛细管电泳柱等。

气相柱:气相柱又分为填充柱和毛细管柱。

进口柱主要有:agilent、J&W等,种类众多、价格较贵。

国产柱:兰州化物所,北大化学系研制的色谱柱性能较好。

国产柱已完全能与进口柱媲美。

液相柱:进口柱:agilent、waters、岛津等,价格较贵。waters的口碑最好。

国产柱:大连依立特,北京迪马,价格便宜。

作为一般常用的C18柱,国产柱子都能满足要求,柱寿命也较长。

如要进行高pH的操作,最好购买进口柱。

毛细管电泳:为一般科研用,购买河北永年光纤厂的空心柱就可以了。

hjl_942:

1、液相色谱柱品牌:

Waters、岛津、Agilent、HP、PE、Varian、SSI、Beckman、Allteck、Kromasil、Hitech、SP、Bio-Rad、吉尔森(法)、大连依利特、大连江申、北京温分、南京科捷、无锡中天、Hypersil、Intersil、Nucleosil、Shodex、Tsk、Whatman、YMC、VYDAC、三菱 TOSOH Merck Supelco、HITACHI(日立)、戴安、JASCO。

一般进口的质量要好一点,但价格比较贵,我一般用Waters的,感觉比较好。

国产的也还行,我基本是用大连依利特的,价格比较适中,效果也还不错。

当然你主要还是选好柱子的种类,不同的东西要用不同的柱子,这是更重要的。

2、氨基柱的使用:

需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18、C8柱的键合官能团C18、C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时(分析其中的糖份),酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。这时,Kromasil专家所给的建议是:用5~10倍的柱体积的含0.5~1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。

氨基柱的清洗:简单说起来,正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱你就参照C18的清洗方法。

3、氰基柱的使用:

是正相柱一般用于正相色谱,但又可用于反相色谱(即是正相柱用反相条件)。其在用于正相色谱时,可用如正己烷等低极性流动相,在用于反相色谱时,可使用甲醇或水的强极性流动相。在反相色谱中疏水性相对较低,并且由于具有腈基,与ODS(反相)比较有不同的选择性。作反相用时适用于在ODS上分离时间太长的组分的分离。正相条件下使用的冲洗方法:正相条件下使用你就参照硅胶柱的方法;反相条件下使用你就参照C18的方法。

4、苯基柱的使用:

属于正相色谱,反相色谱都可以用,多用于含苯基的物质,属于专用柱子。其在用于正相色谱时,可用如正己烷等低极性流动相,参照对应的硅胶柱,在用于反相色谱时,可使用甲醇或水的强极性流动相,参照对应的C18柱子。冲洗方法同氰基柱。

作者:青岚 点击:

    热门文章TOP